تحليل البول الشامل من الالف الى الياء الجزء الثاني

From A to Z in Complete Urine Analysis (Urinalysis) (The method only)-Part Two

تحليل البول الشامل من الالف الى الياء – الجزء الثاني

I) Introduction

In this part we will talk about the microscopic examination of urine sediment and its significance 

في الجزء ده هنتكلم عن فحص الراسب بتاع البول تحت الميكرسكوب واهمية او تشخيص كل حاجة هنشوفها 

Why we should examine urine sediment microscopically?

Microscopic examination of urine sediments helps in the diagnosis of renal and urinary tract diseases with the chemical analysis by reagent strips (click here to see the chemical analysis of urine) where with microscopy 

  • One can detect those cellular and non-cellular elements of urine that do not give distinct chemical reactions.
  • Microscopy can also serve as a confirmatory test in some circumstances (e.g.,  erythrocytes, leukocytes, bacteria).
  • Useful for those samples with abnormal dipstick results.

For example if the reagent strip doesn’t give positive reaction for WBCs while the sample contain large amounts of WBCs, you will detect it during microscopic examination.

also if the reagent strip give positive result for WBCs, you can confirm this under microscope.


ليه لازم نفحص الراسب اللى هيطلع من البول بعد الطرد المركزي؟

عشان الفحص الميكرسكوبي بيساعد على تشخيص امراض الجهاز البولي بجانب التحليل الكيميائي اللى شوفناه في الجزء الاول (اضغط هنا لمشاهدة الجزء الاول) ومع الفحص الميكرسكوبي بنشوف كمان الخلايا والاملاح وغيرها من الحاجات اللى مبتتفاعلش كيميائيا باي حاجة وبالتالي مشهنقدر نلاقي طريقة نكشفها بشريط بول ….. وكمان ممكن نستخدم الفحص الميكرسكوبي كتأكيد خصوصا فحالات كرات الدم البيضا والحمرا والبكتريا يعنى مثلا ممكن شريط البول يديك ان مفيش كرات دم بيضا لكن ممكن تشوف كرات دم بيضا كتير تحت الميكرسكوب يبقى الصح ان فيه كرات دم بيضاء وفالحالة دى لازم تعيد النظر في شريط البول اللى انت بتستخدمه لانه ممكن يكون بقى غير صالح …. كمان ممكن تلاقي ان فيه كرات دم بيضا بشريط البول فانت لما تشوف تحت الميكرسكوب هتلاقي فيه كرات دم بيضا يبقى انت بتتاكد من النتيجة الغير طبيعية اللى انت هتكتبها في التقرير.

What items can we see in urine sediment under microscope?

The Chemist or clinician who is in training on urine analysis for first time will ask about what he search for in urine sediment under microscope and how he evaluate each item 

The items you find in urine under microscope are classified as following:

A) Cellular Items:

Are derived from two sources:

(1) Spontaneously exfoliated epithelial lining cells of the kidney and lower urinary tract, and

(2) cells of hematogenous origin (leukocytes and erythrocytes).

B) Non-Cellular Items:

(1) Crystals.

(2) Casts.

(3) Mucus.

C) Organisms:

(1) Bacteria.

(2) Fungi.

(3) Sperms.

(4) Parasites.

D) Artifacts

(1) Starch

(2) Pollen grains

(3) Oil droplets

(4) Air bubbles

(5) Fibers

(6) Fecal contamination

لما بتكون بتدرب شخص كيميائي او حتى دكتور تحاليل لسة جديد فالمجال على تحليل البول وتقوله هنفحص البول تحت الميكرسكوب هيقولك ماشى بس ايه الحاجة اللى هدور عليها تحت الميكرسكوب هتقوله الحاجات اللى هنشوفها تحت الميكرسكوب بنقسمها كالاتي …. هنقسمها لخلايا وحاجات غير خلوية وكائنات دقيقة … الخلايا هتكون اما الخلايا اللى بتبطن الكلية والجهاز البولي عموما اما هتكون من خلايا من الدم وطبعا خلايا الدم مفهاش غير كرات دم بيضا وكرات دم حمرا …. بالنسبة للحاجات الغير خلوية بتكون اما املاح وطبعا لكل ملح ليه شكله واما casts او اللى هي مرادف لكلمة collections تجمعات اوmolding الصب  وهنفهم قدام ليه اخترت المرادف ده ليها …. واخير الكائنات الدقيقة ذي البكتريا او الفطريات او الطفيليات

What is the normal value for each item?

 Actually there in no reference or normal values for items found in urine sediments because

(1) There is variation in the concentration of random urine samples in the same day where there is no normal reference value for each item in normal urine so it is better to use the first morning sample.

(2) there is no specific standard procedure for sediments concentration by centrifugation 

Therefore individual laboratories should establish there own reference values …… that is good but how i can standardize the microscopic examination in my lab? its simple… there are some factors if you standardized them then you have a standard procedure for microscopic examination of urine sediments ….. they are according to National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS):-

  • Volume of Urine examined: 12 ml is the recommended amount for examination (You should make your reference values using this volume using normal samples or commercial standards) …. if the sample volume is less than 12 ml, a corresponding factor must be applied to all numeric sediments counts and if the sample volume is more than 12 ml, mix it will then take 12 ml.
  • Time of centrifugation: to ensure equal sedimentation of all specimens …. the recommended time for centrifugation is 5 minutes.
  • Speed of centrifugation: the recommended speed is 400 g and according to the WHO the speed is 2000 g
  • Volume of sediment examined: you should re-suspend the sediment in constant volume by distilled water.
  • Reporting format: Every person at a given laboratory who performs a microscopic examination should use the same terminology, reporting format and reference ranges. Decisions about which formed elements should be reported and quantitated should be made by the individual laboratory based on the patient population and professional skill level of the people performing the testing.

Now I should ask you a question …. in case of the speed of the centrifugation, Is the speed of any centrifuge using the same rpm equal??? of course not because the speed depends on the Rotor Radius (from center of rotor to sample) in centimeters ….. That is good, but how you can calculate the speed of the centrifuge? you will use the following equation:-

Where

  • RCF = relative centrifugal force (expressed in in units of times gravity (× g))
  • R      = Rotor radius (i.e. the rotating disc of the centrifuge) in CM
  • S      =the speed of the centrifuge in  rotations per minute (rpm)

For example, in the WHO manual, the speed for centrifugation to prepare the urine sediment is 2000 g (as we will see) and the rotor radius of your centrifuge is 7 CM, so to know the rpm you should adjust your centrifuge at, you can calculate it from the previous equation (2000 g = 1.118 x 10-5) 7 x S2), then the (S) = 5000 rpm

هل فيه فعلا قيم طبيعية او ذي ما بنقول بالبلدي نورمالات لكل حاجة هنشوفها تحت الميكرسكوب؟؟ الحقيقة لا …. ليه لانه مفيش قيم ثابته متفق عليها لكل حاجة بنشوفها في البول تحت الميكرسكوب نتيجة لاختلاف تركيز البول عند نفس المريض يعنى انت ممكن تجيب عينة بول الصبح مركز فالضهر مخففة ممكن تقعد فترة طويلة متشربش وسط اليوم يجي مركز فمينفعش اقول عليك كويس الصبح وعيان بعد الضهر ده غير ان مفيش طريقة قياسية متفق عليها للطرد المركزي اللى بنعمله لعينة البول عشان نركز الراسب بتاعه وبالتالي كل معمل هنا لازم يحط القيم الثابتة او النورمالات ليه يعنى عن طريق ان هيجيب عينات من ناس طبيعية ويحللها عنده ويحط القيم الطبيعية لكل حاجة عنده ….. طيب هتعمل ده اذي؟؟؟ …. فيه شوية حاجات لو خلتهم ثابتين عندك يبقى انت عملت خطوات قياسية وتحليل البول عندك هيكون دقيق …… حجم البول اللى هتحطه في الطرد المركزيده بقى لازم يكون 12 مللي طبقا لNCCLS اللجنة الوطنية لمعايير المختبرات الطبية هتعمل التحليل بتاعك علىى عينات طبيعية باستخدام الحجم ده أو باستخدام المحاليل القياسية التجارية …. طيب لو كانت العينة اقل من 12 مللي اساسا يبقى هتشتغلها كلها عادي لكن هتضرب في عامل او Factor عشان تخلي القيم على انها فعينة 12 مللي ومتناسبة مع القيم القياسية اللى انت حطتها ….. الوقت اللى هتسيب العينة خلاله في الطرد المركزي: لازم يكون 5 دقايق وده عشان تضمن معدل ترسيب ثابت للحاجات اللى في البول فكل العينات ….. سرعة الطرد المركزي: ودي بقى معتمدة على قطر القرص اللى بيلف في جهاز الطرد المركزي ودى ليها معادلة تحسبها عشان تعرف هتظبط الطرد المركزي على كام لفة يعنى منظمة الصحة العالمية قالت سرعة الطرد المركزي 2000 بس دى مشمعناها 2000 لفة في الدقيقة لكن انت هتحسب كام لفة في الدقيقة على حسب قطر القرص الدوار في جهاز الطرد المركزي شوف المعادلة السابقة والمثال. ….. كمان جحم الراسب اللى هتحطه على الشريحة وهتعد فيها الخلايا او هتقييم الاملاح من الاخر احنا فالخطوات بنحط بول او ماية مقطرة عشان تخلي الراسب يبقى معلق تانى بس طبعا بعد ما بترمي الsupernatant بس لازم يكون البول الماية المقطرة بحجم ثابت …. كمان طريقة كتابة التقرير والمصطلحات اللى هتتكتب والقيم الثابتة  وكمان القرارت اللى هتتاخد بالحاجات اللى هتتكتب في التقرير

Comments

Facebook Comments

Leave a Reply