عد صفايح الدم يديا بالتفصيل – الطريقة فقط

Detailed Manual Platelet count (PLT count)-The method only

Introduction

Here we will talk about the method only and we don’t mention the condition in which the PLTs increased or decreased but we will mention it in anther posts

هنتكلم بس عن الطريقة المانول فقط ومشهنتكلم عن تفسير النتايج لكن هنتكلم عنها ان شاء الله في موضوع صورة الدم الكاملة قريبا

The aim and the Value of test:

A platelet count may be requested to investigate abnormal skin and mucosal bleeding which can occur when the platelet count is very low . Platelet counts are also performed when patients are being treated with cytotoxic drugs or other drugs which may cause thrombocytopenia.

بنعمل عد صفايح الدم لما نلاقى واحد بينزف من الجلد او من الاغشية المخاطية ذى نزيف الانف مثلا وده ممكن يحصل لما تكون الصفايح قليلة وكمان بنعملها لما حد يحصله تسمم او بياخد ادوية بتقلل الصفايح كمتابعة للحالة يعنى

Principle of  the test

Blood is diluted 1 in 20 in a filtered solution of ammonium oxalate reagent which lyzes the red cells. Platelets are counted microscopically using an Improved Neubauer ruled counting chamber and the number of platelets per litre of blood calculated.

فكرة العمل اننا بنعمل تخفيف 1 الى 20 باستخدام الامونيم اوكسلات عشان ده بيكسر كرات الدم الحمرا فبالتالى لما نيجى نعد فالمربعات الصغيرة اللى بنعد فيها كرات الدم الحمرا ميحصلش لخبطة

وبعد كدة بنعد الصفايح على الهيموسيتومتر ذى ما هنشوف دلوقتى

Blood sample:

Use EDTA anticoagulated venous blood.

Capillary blood should not be used because plateletsclumpas the blood isbeing collected

هنا بيقول عينة دم عليها مانع تجلط وميكونش من شكة الصباع عشان طبعا لما بنشك الصباع والدم يتعرض للهوا بتبدأ عملية تكسير الصفايح بسرعة عشان يحصل الجلطة فالبتالى ده ممكن يعمل معايا خطأ فالنتيجة

Tools:


1) Counting chamber (hemocytometer)

The counting chamber recommended for cell counts is

–       A metallized surface (‘Bright-line’)

–       Double cell Improved Neubauer ruled chamber.

Non-metallized haemocytometers: While these are less expensive, they are not recommended because the background rulings and cells are not as easily seen which makes it is more difficult to count PLTs reliably using this type of chamber . Non-metallized chambers are also more difficult to fill.

Improved-Neubauer-ruled-counting-chamber-non-metalized2

Improved-Neubauer-ruled-counting-chamber-metalized3

—————————————————————————————————————

بيتكلم عن الهيموسيتومتر … لازم يكون metalized يعنى الغرفة تكون خلفيتها فضية كدة او بتلمع عشان تبقى خطوط غرفة العد واضحة ذى ما شايفين الصو … كمان لازم يكون الهيموسيتومتر فيه غرفتين من مشغرفة واحدة.

الهيموسيتومتر اللى ميكونش فيه خلفية غرفة العد فضية بيكون ارخص ولكن لا يرجح استخدامه عشان الخطوط بتاعة غرفة العد بتكون غير واضحة وده ممكن يخلينا نعد غلط ده غير انها بتكون صعب تحط فيها العينة.

cover glass for hemocytometer2) Counting chamber cover glasses

Special optically plane cover glasses of defined thickness (designed for use with hemocytometers) are required.

Other cover glasses must not be used.

Manufacturers of counting chambers provide two cover glasses with each chamber.

The laboratory should always keep in stock spare cover glasses.

بالنسبة للكفر الزجاج (glass cover) …. الهيموسيتومتر بيكون ليه كفر مخصوص بيه بيكون جاى مع الهيموسيتومتر وبيكون 2 واحد لكل غرفة عد ….. مينفعش استخدم اى كفر زجاج عادى ولازم اكون شايل عندى فالمخزن كفر زيادة عشان لقدر الله لو ال2 اللى جاين مع الهيموستومتر اتكسروا يبقى عندى كفر زيادة والشغل ميقفش.

220px-Pasteur_PipetsPasteur-Pipette3) Pipettes/calibrated capillaries and safe filling device

We need 3 types of Pipettes

First: Graduated Pipette of 1 ml volume to get the volume needed from the diluting fluid

Second: Pasteur pipette of a capillary pipette to mix the blood sample and with diluting fluid

Third: Calibrated pipette of 20 µl (0.02 ml, 20 cmm) to aspirate 20 µl accurately

 Sahli PipetteIn case of Calibrated Pipette:

==> You may buy a Calibrated pipette of 20 µl (0.02 ml, 20 cmm) e.g. Sahli is required to measure blood samples.

==> Of It may be supplied with hemocytometers by some manufacturers and it is called a Bulb Pipette. and there is 2 Bulb pipettes supplied; one for Red blood cell count and one for WBCs count,>>>>>>  

BUT:

  • Bulb Pipettes should not be used for counting PLTs because it is not possible to obtain reliable mixing of the blood and diluting fluid inside the bulb of the pipette.

  • Bulb pipettes are also difficult to clean and expensive to replace

A safe pipette/capillary filler should be used to aspirate and dispense the blood. This can be a simple bulb filler or device.  (CLIKC HERE TO SEE THE Pipette filter)

هنا بنتكلم عن نوع الماصة اللى هنستخدمها … اول نوع عبارة عن ماصة مدرجة من صفر الى 1 ملليلتر ودى هنستخدمها عشان ناحد بيها 1 ملليلتر من محلول التخفيف ذى ماهنشوف بعد شوية … النوع التانى عبارة عن باستير بيبت او ماصة خاصة بالانابيب الشعرية عشان نقلب العينة مشاكتر … والماصة التالتة عبارة عن ماصة بنسميها calibrated pipette يعنى ماصة حجمها ثابت ذى مثلا ماصة ساهلى دى بتبقى 20 ميكروليتر مثلا ودى عشان ناخد بيها عينة الدم  … وبرضو ضى الbulb pipette ذى اللى فالصورة الجاية ودى بتبقى عبارة عن ماصة فيها انتفاخ زجاجى كدة صغير … ودى بتبقى جاية مع الهيموستومتر وبيبقى واحدة مخصوصة لعد الدم الاحمر وواحدة مخصوصة بعد الدم الابيض وبنفرق بينهم اذاى؟؟ الماصة بتاعة عد الدم الاحمر بيبقى فيها نقطة حمرا او بنسميها خرزة حمرا والماصة بتاعة عد الدم الابيض بيبقها فيها خرزة بيضا….. ولكن الbulb pipette دى بالرغم انها جاية مع الهيموسيتومتر الا انه لا يفضل اننا نستخدمها فى عد دم كرات الدم البيضا عشان عشان تقليب العينة وخلطها بمحلول التخفيف مشبيبقى بصورة جيدة وكمان صعب تنضيفها وغالية 

بس عموما فكل نوع من دول لازم نستخدم pipette filter وده عبارة عن حاجة بتخليك تسحب اى محلول او عينة الدم بس ممشبققك عشان نتجنب حدوث اى خطر على الشخص اللى بيقوم بعمل التحليل

—————————————————————————————————————

blood-diluting-pipettes-for-white-corpuscles blood-diluting-pipettes-for-red-corpuscles

————————————————————————————————————

They are differ in the volume

You can use Variable Micropipette instead of all the THREE types

 micropipettes-a-volume-variable

4) Hand counter

To count white cells accurately, a simple inexpensive mechanical hand tally counter or bead counter

Turning the knob on the side returns the counter to zero after each count.

ده مجرد عداد للخلايا بتمسكه فايدك وانت بتعد عشان متتلخبطش لو عديت بالنظر

hand-tally-counter

Bead-Score-Counter

—————————————————————————————————————

Reagent

CLICK HERE to see how you can prepared it manually in the lab

It is a diluting fluid contains Ammonium oxalate 10g/l

we use Ammonium Oxalate because it destroy PLTS making the platelet clear to count

ده عبارة عن محلول حمضى عشان يكسر كرات الدم الحمرا

——————————-

See Procedure in Page 2

Comments

Facebook Comments

Leave a Reply