تحليل الكرياتينين في الدم في المعمل|طريقة جافيه|الفكرة العامة

تحليل الكرياتينين في الدم في المعمل

من دلائل وظائف الكلية

طريقة جافيه

الفكرة العامة

I) Introduction

1) Names:-

Formal name: Creatinine

Also known as: Creat; Blood Creatinine; Serum Creatinine; Urine Creatinine.

2) What is the Creatinine?

اقراها في تحليل الكرياتينين التعريف وتثقيف المريض . اضغط هنا

3) Why it is required?

اقراها في تحليل الكرياتينين التعريف وتثقيف المريض . اضغط هنا

4) When should you get tested?

اقراها في تحليل الكرياتينين التعريف وتثقيف المريض . اضغط هنا

5) What are the needed preparations before the test?

اقراها في تحليل الكرياتينين التعريف وتثقيف المريض . اضغط هنا

II) Required sample:-

SST tubes and LT green tubes

1) Sample type:-

a) Primary sample:-

  • Type:- serum
  • Required Sample volume:- 2 ml blood (minimum 500 μl serum).
  • Container:- Serum-separating tube (SST) (Gold or Red) or any clean tube without any additives.

b) Alternative sample:-

  • Type    :-       Plasma
  • Required Sample volume:- 2 ml blood (minimum 500 μl plasma).
  • Container     :-      Lithium heparin PST (Lt. Green). (i.e. Plasma separator tubes)

c) Storage and Stability:-

  • At room temp (15-30 oC): 4 hours;
  • Refrigerated (2-8oC) : 1 week.
  • Frozen (-200C) : 2 weeks.

d) Sample transportation

  • The sample should be refrigerated during transportation.


أولا هنتكلم عن نوع العينة … العينة الأولية اللى لازم تسحبها وتعمل عليها التحليل هي السيرم … بتحتاج 3مل دم واقل حاجة 2 مللي دم او من الاخر 0.5 ملي سيرم او بلازما على الأقل .. بتسحب العينة على انبوبة بدون أي إضافات بتبقى انبوبة مخصوص للسيرم بغطى احمر او اصفر … ولو مكانش متاح تسحب سيرم ممكن تشتغل على عينات بلازما بس هتسحب البلازما على هيبارين والانبوبة بتكون بغطى اخضر … الكرياتينين بيكون ثابت في السيرم او البلازما ممكن لمدة 4 ساعات عند درجة حرارة الغرفة من 15 درجة ل30 درجة ولمدة أسبوع كامل في التلاجة عند درجة حرارة من 2 ل8 وممكن في الفريرز لمدة اسبوعين عند درجة حرارة سالب 20 … في النقل لازم تتنقل وهى متلجة يعنى عند درجة حرارة 2 ل8.

Question

The test requires only 100µl or 0.11ml serum or plasma. So, why the required sample is 500μl  as minimum?

Answer:

Because you may need to repeat the test more than one time if you suspect the result or find out an error in the procedure or may be the patient’s doctor require some further testing, so, you can do it by the sample you have considering the volume of the required test and the storage period of sample that compatible with the analyte should get tested.

ليه العينة المطلوبة 500 ميكرو سيروم او بلازما بالرغم انى بحتاج 100 ميكرو للتحليل او يعنى 0.1 مللي؟ عشان ممكن تحتاج انك تعيد التحليل اكتر من مرة لو شاكك في النتيجة او حتى اكتشفت ان فيه مشكلة حصلت في الخطوات اثناء عمل التحليل … او عشان ممكن الدكتور بتاع المريض يطلب تحاليل تانية فتقدر تعملها من العينة ال عندك مع الاخذ في الاعتبار حجم العينة المطلوب للتحليل المطلوب وفترة تخزين العينة المناسبة مع المادة المطلوب قياسها في العينة

2) Sample collection method:-

eppendorf tube

Eppendorf tube

Serum or plasma samples are collected by collecting a blood sample from the vein through phlebotomy process by a phlebotomist, medical laboratory specialist, medical assistant or nurse who is highly trained for venipuncture process.

In case of serum sample:-

  • Collect the blood sample in the SST tube (red or gold) then allow the sample to stand for 15 to 30 min maximum to allow the blood to form a clot.
  • Then, centrifuge at 2500 rpm for 10 min.
  • Then separate the serum (the straw-colored fluid in the first layer) by a micropipette into an Eppendorf tube. Thus you can store the sample if you can’t perform the test within 3 hours or to perform other serum-requiring tests requested by the physician.

In case of plasma sample:-

  • Collect the blood sample in the Lithium heparin PST (Lt. Green) tube  Mix the sample with heparin gently without shaking.
  • Then, centrifuge at 2500 rpm for 10 min.
  • Then separate the Plasma (the straw-colored fluid in the first layer) by a micropipette into an Eppendorf tube. Thus, you can store the sample if you can’t perform the test within 3 hours or to perform other serum-requiring tests requested by the physician.

طريقة تجميع العينة … عينة السيرم او البلازما بتتجمع عن طريق سحب عينة دم من الوريد عن طريق متخصص لسحب عينة عينات الدم من الوريد ويطلق عليه فليبوتومست phlebotomist وممكن مساعد دكتور او ممرضة متدربين على عملية سحب الدم من الوريد

في حالة عينة السيرم:- تجميع الدم بيكون في انوبة فاكوتينر يعنى مفرغة من الهواء وغطاها لونه اصفر او دهبي او احمر ومفيش فيها أي اضافات لمنع التجلط .. وبعد السحب بتسيب العينة لمدة نص ساعة بالكتير عشان الدم يتجلط .. بعد كدة بتفصل السيرم بجهاز الطرد المركزي عند سرعة دوران 2500 لفة في الدقيقة لمدة 10 دقايق. بعد كدة بتفصل السيرم (هو السائل اللى لونه اصفر لون القش) وبيكون اول طبقة .. هتفصل باستخدام الميكروبيبت في انبوبة ابيندورف … بالتالي ممكن تخزن العينة في التلاجة لو مقدرتش تشتغلها في خلال 3 ساعات.

في حالة عينة البلازما:- تجميع الدم بيكون بنفس طريقة السيرم بس بنحط الدم في انبوبة الهيبارين ال بالغطا الأخضر وبتفصلها في ابندورف برضو لو مشهتعرف تشتغلها في خلال 3 ساعات

3) Criteria for sample rejection:-

  • Hemolysed serum or plasma:- because it may give very high results
  • Contaminated/turbid samples
  • If the serum or plasma is icteric (i.e. high bilirubin level) or lipaemic this should be reported and the sample not rejected.

امتى ترفض العينة … عينة دم بيكون فيها كرات الدم الحمرا اتكسرت وانت بتسحب العينة … دى متنفعش عشان بتدي نتايج عالية … وكمان لو العينة متعكرة هترفض العينة.. ولو فيها دهون كتير او فيها نسبة صفرا عالية قوي بنخفف وبنعمل التحليل ونكتب ده في التقرير .. يعنى تكتب في التقرير ان العينة كان فيها نسبة دهون عالية.

III) The Test:-

Colorimetric-kinetic technique (Jaffé’s METHOD)

The General concept

1) Principle

1) Basics of Colorimetric technique:-

اقراء الفكرة العامة للطريقة الكلوريمترك من هنا

2) Applying principle of colorimetric technique on the measurement of creatinine activity:-

creatinine-blood-test-equation

In creatinine test, the reaction of creatinine with picric acid, in alkaline medium, forms creatinine-picrate; the orange-yellow colored complex whose concentration is directly proportional to the creatinine concentration. The concentration of the colored complex is measured by the photometer of spectrophotometer at 500±20nm.

(0/5)0

Comments

Facebook Comments

Leave a Reply